NCI-H647 (人肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)

　　名稱NCI-H647(人肺癌細(xì)胞)(STR鑒定正確)

　　別稱H647;H-647;H647ell;NCIH647

　　種屬人

　　年齡（性別）男；56歲

　　組織來源肺腺癌，非小細(xì)胞肺癌；轉(zhuǎn)移部位：胸腔積液

　　生長特性貼壁細(xì)胞

　　細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

　　背景描述The line was established in October 1983.56 years Caucasian male The patient received prior radiation therapy.The tissue donor was a non-smoker.

　　生物安全等級1

　　生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10%FBS+1%P/S

　　推薦傳代比例1:3-1:6

　　推薦換液頻率2~3次/周

　　凍存條件凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

　　培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

　　保藏機(jī)構(gòu)ATCC;CRL-5834

　　運輸和保存

　　干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

　　（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

　　（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

　　細(xì)胞接收后的處理

　　1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

　　2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

　　3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

　　4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

　　一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

　　1）準(zhǔn)備1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基48.5%

　　F-12基礎(chǔ)培養(yǎng)基48.5%

　　優(yōu)質(zhì)胎牛血清2%

　　P/S青霉素-鏈霉素1%

　　2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

　　3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

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